标贴式生物切片制作工艺的14步骤优势
2020-08-17
一种标贴式生物切片制作工艺, 其特征是:主要步骤主要步骤(l)取材:动物或 植物器官材料;(2)固定:将所取材料用甲醛或冰乙酸或乙醇药液其中一 种快速杀死并固定,使其保持原来的生活状态;(3)水洗:材料经杀死固 定后,用水或50%乙醇洗涤液洗去材料中的固定液;(4)脱水:用乙醇或 正丁醇或叔丁醇或丙酮其中一种药剂把材料中的水分全部替代出来;(5) 透明:材料脱水后,常用二甲苯作为透明剂,这是因为它既能与脱水剂又 能与石蜡混合,便于包埋剂渗入到材料组织中去;(6)浸蜡:材料完全透 明后,用石蜡替换材料中的二甲苯,并使石蜡渗透到材料组织中去;(7) 包埋:将材料与石蜡同时倒入一纸盒内并摆放好材料,然后冷却;(8)切 片:经分割修整,蜡快材料即可上机切片,切片厚度一般调整为10微米 左右;(9)展片:切片机所切出的切片有给折,因此要在盛有温水的容器 内进行展片;(10)移片:采用环氧树脂材料作为切片载体,将展好的切 片一一摆放上去,每张载体可放置一百至数百个切片;(11)脱蜡:切片 摆放好后,经过几小时的晾干,即可在一个容器内用二甲苯集中脱蜡;(12) 染色:切片上的蜡被二甲苯完全溶去后,用无水乙醇和从95%至50%浓 度梯度的乙醇处理,然后进行集中染色,如此可保证染色均匀一致;(13) 透明:切片被染色后,用50%至无水乙醇浓度梯度的乙醇处理,再用二甲 苯进行集中透明;(14)封片:将通过二甲苯透明的切片,采用高光树脂 喷膜封片,然后经过烘干、分割,并根据需要,象贴标签一样将其贴在载 玻片的中部,这样,一次就可制作出一百至数百张切片来。